ІФА-тэст: у чым прынцып?

ІФА-тэст: у чым прынцып?

Вызначэнне: што такое тэст ІФА?

Тэхніка імунаферментнага аналізу - на англійскай мове Enzyme-Linked Immuno Assay - або ELISA - гэта імуналагічны тэст, які дазваляе выяўляць або аналізаваць малекулы ў біялагічным узоры. Ён быў канцэптуалізаваны і распрацаваны двума шведскімі навукоўцамі, Пітэрам Перлманам і Евай Энгвал са Стакгольмскага ўніверсітэта ў 1971 годзе.

Малекулы, якія аналізуюцца метадам ELISA, звычайна ўяўляюць сабой вавёркі. Да тыпаў узораў адносяцца вадкія біялагічныя матэрыялы – плазма, сыроватка, мача, потаадлучэнне, культуральныя асяроддзя клетак або рэкамбінантны бялок – бялок, які выпрацоўваецца клеткай, генетычны матэрыял якой быў зменены шляхам генетычнай рэкамбінацыі – ачышчаны ў раствор.

ІФА-тэст у асноўным выкарыстоўваецца ў імуналогіі для выяўлення і / або вымярэння прысутнасці бялкоў, антыцелаў або антыгенаў ва ўзоры. Гэты сералагічныя тэст выяўляе, у прыватнасці, антыцелы, якія выпрацоўваюцца арганізмам у адказ на віруснае заражэнне.

Прынцып ІФА-даследавання на інфекцыйныя захворванні

Выкарыстанне антыцелаў для дыягностыкі інфекцыйных захворванняў уяўляе сабой спецыфічны і хуткі метад. Тэхніка ELISA - гэта імунаферментатыўная методыка, якая дазваляе візуалізаваць з біялагічнага ўзору рэакцыі паміж антыгенам - целам, якое жывы арганізм разглядае як чужароднае - і антыцеламі з дапамогай каляровай рэакцыі, выкліканай маркерам фермента - звычайна шчолачная фасфатаза і пероксидаза - раней далучаныя да антыцелаў. Каляровая рэакцыя пацвярджае ідэнтыфікацыю выдзеленай бактэрыі або наяўнасць патрэбнага віруса, а інтэнсіўнасць афарбоўкі дае ўказанне на колькасць антыгенаў або антыцелаў у дадзеным узоры.

Розныя тыпы ІФА-тэстаў

Існуюць чатыры асноўных тыпу тэсту ІФА:

  • ІФА прамы, дазваляе выяўляць або вымяраць антыцелы. Ён выкарыстоўвае толькі першаснае антыцела;
  • ІФА непрамы, найбольш шырока выкарыстоўваны, таксама дазваляе выяўляць або аналізаваць антыцелы. У ім выкарыстоўваюцца другасныя антыцелы, што забяспечвае лепшую адчувальнасць, чым прамы ІФА;
  • ІФА ў конкурсе, дазваляе дазоўку антыгенаў. Вырабляецца ў выніку канкурэнцыі за аблігацыі, ён не выкарыстоўвае фермент;
  • ІФА «у бутэрбродзе», дазваляе дазоўку антыгенаў. Гэты метад звычайна выкарыстоўваецца ў даследаваннях.

З дапамогай ІФА-тэсту

Тэст ІФА выкарыстоўваецца для:

  • Знаходзіць і вымяраць антыцелы ў сералогіі для дыягностыкі інфекцыйных захворванняў: вірусалогіі, паразіталогіі, бактэрыялогіі і інш.;
  • Дозы бялкоў у нізкіх канцэнтрацыях: спецыфічныя дазоўкі некаторых бялкоў плазмы (імунаглабулін Е (IgE), ферритин, бялковыя гармоны і інш.), опухолевые маркеры і інш.;
  • Дазуйце малыя малекулы: стэроідныя гармоны, гармоны шчытападобнай залозы, лекі...

Самыя распаўсюджаныя выпадкі: Covid-19, Дэнге, ВІЧ, Лайма, алергія, цяжарнасць

Тэст ІФА выкарыстоўваецца, у прыватнасці, для дыягностыкі многіх інфекцыйных захворванняў:

Хваробы, якія перадаюцца палавым шляхам (ЗППП)

У тым ліку гепатыт, пранцы, хламідіоз і ВІЧ. Рэкамендаваны органамі аховы здароўя, гэта асноўны скрынінгавы тэст на СНІД: ён паказвае наяўнасць антыцелаў супраць ВІЧ і антыгена р24 праз шэсць тыдняў пасля заражэння.

Абласныя або эндэмічныя захворванні

Жоўтая ліхаманка, Марбургская вірусная хвароба (MVM), Ладэнга, хвароба Лайма, Чыкунгунья, ліхаманка даліны Рыфт, Эбола, ліхаманка Ласа і інш.

Ковід-19

Тэст ELISA, які праводзіцца больш чым праз 2-3 тыдні пасля з'яўлення сімптомаў, дазваляе менш чым за гадзіну вызначыць наяўнасць антыцелаў супраць SARS-CoV-2.

Вірусныя ўзбуджальнікі, якія выклікаюць ўнутрычэраўныя інфекцыі

Напрыклад, таксаплазмоз, краснуха, цітомегаловірус, просты герпес.

Іншыя выпадкі

Але ён таксама знайшоў прымяненне ў выяўленні:

  • Цяжарнасці;
  • Аутоіммунные захворванні;
  • Харчовыя алергены: колькаснае вызначэнне агульнага імунаглабуліну Е (IgE) дапамагае ў ацэнцы і лячэнні алергіі;
  • Гарманальныя збоі;
  • Онкомаркеры;
  • Вірусы раслін;
  • І многае іншае

Надзейнасць тэсту Covid-19

У рамках выяўлення антыцелаў супраць SARS-CoV-2 пілотнае даследаванне, праведзенае ў жніўні 2020 г. Інстытутам Пастэра, CNRS, Inserm і Парыжскім універсітэтам, пацвярджае надзейнасць тэсту ELISA: абодва пратэставаныя тэсты ELISA выкарыстоўваюць увесь бялок N SARS-CoV-2 (ELISA N) або пазаклеткавы дамен шыпа віруса (S) у якасці антыгенаў-мішэняў. Гэты метад дазволіў бы ідэнтыфікаваць антыцелы больш чым у 90% выпадкаў з вельмі нізкім узроўнем прытворнададатных вынікаў у 1%.

Кошт і кампенсацыя ІФА-тэсту

Тэсты Elisa, якія праводзяцца ў аналітычных лабараторыях па прызначэнні лекара, каштуюць каля 10 еўра і кампенсуюцца ў памеры 100% медыцынскай страхоўкай.

Праводзяцца ў бясплатных інфармацыйных, скрынінгавых і дыягнастычных цэнтрах (CeGIDD), яны могуць быць бясплатнымі на ВІЧ і SARS-CoV-2.

Пакінуць каментар