змест
ІФА-тэст: у чым прынцып?
Вызначэнне: што такое тэст ІФА?
Тэхніка імунаферментнага аналізу - на англійскай мове Enzyme-Linked Immuno Assay - або ELISA - гэта імуналагічны тэст, які дазваляе выяўляць або аналізаваць малекулы ў біялагічным узоры. Ён быў канцэптуалізаваны і распрацаваны двума шведскімі навукоўцамі, Пітэрам Перлманам і Евай Энгвал са Стакгольмскага ўніверсітэта ў 1971 годзе.
Малекулы, якія аналізуюцца метадам ELISA, звычайна ўяўляюць сабой вавёркі. Да тыпаў узораў адносяцца вадкія біялагічныя матэрыялы – плазма, сыроватка, мача, потаадлучэнне, культуральныя асяроддзя клетак або рэкамбінантны бялок – бялок, які выпрацоўваецца клеткай, генетычны матэрыял якой быў зменены шляхам генетычнай рэкамбінацыі – ачышчаны ў раствор.
ІФА-тэст у асноўным выкарыстоўваецца ў імуналогіі для выяўлення і / або вымярэння прысутнасці бялкоў, антыцелаў або антыгенаў ва ўзоры. Гэты сералагічныя тэст выяўляе, у прыватнасці, антыцелы, якія выпрацоўваюцца арганізмам у адказ на віруснае заражэнне.
Прынцып ІФА-даследавання на інфекцыйныя захворванні
Выкарыстанне антыцелаў для дыягностыкі інфекцыйных захворванняў уяўляе сабой спецыфічны і хуткі метад. Тэхніка ELISA - гэта імунаферментатыўная методыка, якая дазваляе візуалізаваць з біялагічнага ўзору рэакцыі паміж антыгенам - целам, якое жывы арганізм разглядае як чужароднае - і антыцеламі з дапамогай каляровай рэакцыі, выкліканай маркерам фермента - звычайна шчолачная фасфатаза і пероксидаза - раней далучаныя да антыцелаў. Каляровая рэакцыя пацвярджае ідэнтыфікацыю выдзеленай бактэрыі або наяўнасць патрэбнага віруса, а інтэнсіўнасць афарбоўкі дае ўказанне на колькасць антыгенаў або антыцелаў у дадзеным узоры.
Розныя тыпы ІФА-тэстаў
Існуюць чатыры асноўных тыпу тэсту ІФА:
- ІФА прамы, дазваляе выяўляць або вымяраць антыцелы. Ён выкарыстоўвае толькі першаснае антыцела;
- ІФА непрамы, найбольш шырока выкарыстоўваны, таксама дазваляе выяўляць або аналізаваць антыцелы. У ім выкарыстоўваюцца другасныя антыцелы, што забяспечвае лепшую адчувальнасць, чым прамы ІФА;
- ІФА ў конкурсе, дазваляе дазоўку антыгенаў. Вырабляецца ў выніку канкурэнцыі за аблігацыі, ён не выкарыстоўвае фермент;
- ІФА «у бутэрбродзе», дазваляе дазоўку антыгенаў. Гэты метад звычайна выкарыстоўваецца ў даследаваннях.
З дапамогай ІФА-тэсту
Тэст ІФА выкарыстоўваецца для:
- Знаходзіць і вымяраць антыцелы ў сералогіі для дыягностыкі інфекцыйных захворванняў: вірусалогіі, паразіталогіі, бактэрыялогіі і інш.;
- Дозы бялкоў у нізкіх канцэнтрацыях: спецыфічныя дазоўкі некаторых бялкоў плазмы (імунаглабулін Е (IgE), ферритин, бялковыя гармоны і інш.), опухолевые маркеры і інш.;
- Дазуйце малыя малекулы: стэроідныя гармоны, гармоны шчытападобнай залозы, лекі...
Самыя распаўсюджаныя выпадкі: Covid-19, Дэнге, ВІЧ, Лайма, алергія, цяжарнасць
Тэст ІФА выкарыстоўваецца, у прыватнасці, для дыягностыкі многіх інфекцыйных захворванняў:
Хваробы, якія перадаюцца палавым шляхам (ЗППП)
У тым ліку гепатыт, пранцы, хламідіоз і ВІЧ. Рэкамендаваны органамі аховы здароўя, гэта асноўны скрынінгавы тэст на СНІД: ён паказвае наяўнасць антыцелаў супраць ВІЧ і антыгена р24 праз шэсць тыдняў пасля заражэння.
Абласныя або эндэмічныя захворванні
Жоўтая ліхаманка, Марбургская вірусная хвароба (MVM), Ладэнга, хвароба Лайма, Чыкунгунья, ліхаманка даліны Рыфт, Эбола, ліхаманка Ласа і інш.
Ковід-19
Тэст ELISA, які праводзіцца больш чым праз 2-3 тыдні пасля з'яўлення сімптомаў, дазваляе менш чым за гадзіну вызначыць наяўнасць антыцелаў супраць SARS-CoV-2.
Вірусныя ўзбуджальнікі, якія выклікаюць ўнутрычэраўныя інфекцыі
Напрыклад, таксаплазмоз, краснуха, цітомегаловірус, просты герпес.
Іншыя выпадкі
Але ён таксама знайшоў прымяненне ў выяўленні:
- Цяжарнасці;
- Аутоіммунные захворванні;
- Харчовыя алергены: колькаснае вызначэнне агульнага імунаглабуліну Е (IgE) дапамагае ў ацэнцы і лячэнні алергіі;
- Гарманальныя збоі;
- Онкомаркеры;
- Вірусы раслін;
- І многае іншае
Надзейнасць тэсту Covid-19
У рамках выяўлення антыцелаў супраць SARS-CoV-2 пілотнае даследаванне, праведзенае ў жніўні 2020 г. Інстытутам Пастэра, CNRS, Inserm і Парыжскім універсітэтам, пацвярджае надзейнасць тэсту ELISA: абодва пратэставаныя тэсты ELISA выкарыстоўваюць увесь бялок N SARS-CoV-2 (ELISA N) або пазаклеткавы дамен шыпа віруса (S) у якасці антыгенаў-мішэняў. Гэты метад дазволіў бы ідэнтыфікаваць антыцелы больш чым у 90% выпадкаў з вельмі нізкім узроўнем прытворнададатных вынікаў у 1%.
Кошт і кампенсацыя ІФА-тэсту
Тэсты Elisa, якія праводзяцца ў аналітычных лабараторыях па прызначэнні лекара, каштуюць каля 10 еўра і кампенсуюцца ў памеры 100% медыцынскай страхоўкай.
Праводзяцца ў бясплатных інфармацыйных, скрынінгавых і дыягнастычных цэнтрах (CeGIDD), яны могуць быць бясплатнымі на ВІЧ і SARS-CoV-2.